HPLC的常用術(shù)語解釋
高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。它是在生化和分析化學中常用的柱層析儀。接下來小編為大家整理了HPLC的常用術(shù)語解釋,希望對你有幫助哦!
第一部分 色譜曲線
1、色譜圖(chromatogram):色譜柱流出物通過檢測器系統(tǒng)時所產(chǎn)生的響應信號對時間或流動相流出體積的曲線圖,或者通過適當?shù)?a href='http://wyyxscd8644.com/way/' target='_blank'>方法觀察到的紙色譜或薄層色譜斑點、譜帶的分布圖。
2、(色譜)峰(chromatographic peak):色譜柱流出
3、峰底(peak base):峰的起點與終點之間的連接的直線
4、峰高(h ,peak height):色譜峰最大值點到峰底的距離(圖1 中的BE)。
5、峰寬(W ,peak width):在峰兩側(cè)拐點(圖1 中的F ,G)處所作切線與峰底相交兩點的距離
6、半高峰寬(W h/2 ,peak withd at half height):通過峰高的中點作平行于峰底的直線,此直線與峰兩側(cè)相交兩點之間的距離(圖1 中的HJ)。
7、峰面積(A ,peak area):峰與峰底之間的面積
8、拖尾峰(tailing peak):后沿較前沿平緩的不對稱的峰。
9、前伸峰(leading peak):前沿較后沿平緩的不對稱的峰。(又叫伸舌峰、前延峰)
10、假峰(ghost peak):除組分正常產(chǎn)生的色譜峰外,由于儀器條件的變化等原因而在譜圖上出現(xiàn)的色譜峰,即并非由試樣所產(chǎn)生的峰。這種色譜峰并不代表具體某一組分,容易給定性、定量帶來誤差。(又叫鬼峰)
11、畸峰(distrorted peak):形狀不對稱的色譜峰, 前伸峰、拖尾峰都屬于這類。
12、反峰(negative peak):也稱倒峰、負峰,即出峰的方向與通常的方向相反的色譜峰。
13、原點(origin):紙或薄層板上滴加試樣部位的中心點
14、斑點(spot):平面色譜法中,組分在展開和顯譜后呈現(xiàn)近似圓形或橢圓形的色區(qū)
15、區(qū)帶(zone):在色譜柱、紙或薄層板上被分離組分所占的區(qū)域。
16、復斑(multiple spot):一種組分展開后形成兩個或多個清晰斑點。
17、區(qū)帶拖尾(zone tailing):由于物理、化學等作用的影響,一種組分在展開后形成的彗星形狀斑點。
18、基線(base line):在正常操作條件下,僅有流動相通過檢測器系統(tǒng)時所產(chǎn)生的響應信號曲線。
19、基線漂移(baseline drift):基線隨時間定向的緩慢變化。
20、基線噪聲(N ,baseline noise):由于各種原因而引起的基線波動。
21、統(tǒng)計矩(moment):色譜流出曲線是組分在檢測器中濃度或質(zhì)量依時間的統(tǒng)計分布曲線,響應值對應于分布密度。組分在柱內(nèi)遷移時間 r 次冪的數(shù)學期望稱為流出曲線的 r 階原點矩。而組分在柱內(nèi)遷移時間與平均遷移時間差的 r 次冪的數(shù)學期望稱為流出曲線的 r 階中點矩。
22、一階原點矩(first origin moment):組分在柱內(nèi)遷移時間的數(shù)學期望。當流出曲線為對稱峰時,即為組分的保留時間。
23、二階中心矩( μ2 ,second central moment):二階中心矩為流出曲線的方差。定義為:μ2=E(t-Et)2 式中,E代表平均。
24、三階中心矩(μ3 ,third central moment):定義為:μ3=E(t-Et)3
可以表示流出曲線的不對稱程度。峰形對稱時μ3=0,前伸峰μ3<0 ,拖尾峰μ3>0.
第二部分 分離模式
1、液相色譜法(liquid chromatography ,LC):用液體作流動相的色譜法。
2、液液色譜法(liquid liquid chromatography,LLC ):將固定液涂漬在載體上作為固定相的液相色譜法。
3、液固色譜法(liquid solid chromatography,LSC ):用固體(一般指吸附劑)作為流動相的液相色譜法。
4、正相液相色譜法(normal phase liquid chromatography ,NPLC):固定相的極性較流動相的極性強的液相色譜法。
5、反相液相色譜法(reversed phase liquid chromatography,RPLC ):固定相的極性較流動相的極性弱的液相色譜法。
6、柱液相色譜法(liquid column chromatography ):在柱管內(nèi)進行組分分離的液相色譜法。
7、高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC ):具有高分離效能的柱液相色譜法。
8、尺寸排除色譜法(size exclusion chromatography,SEC ):用化學惰性的多孔性物質(zhì)作為固定相,試樣組分按分子體積(嚴格來講是流體力學體積)進行分離的液相色譜法。
9、凝膠過濾色譜法:(gel filtration chromatography ):水或水溶液作為流動相的體積排除色譜法。
10、凝膠滲透色譜法:(gel permeation chromatography ,GPC):有機溶劑作為流動相的體積排除色譜法。
11、親和色譜法(affinity chromatography ):用連接在基體上的配位體做固定相,使其與蛋白質(zhì)或其他大分子發(fā)生可逆的高選擇性的相互作用,利用不同親和力進行分離的液相色譜法。
12、離子交換色譜法(ion exchange chromatography ,IEC):以離子交換作用分離離子型化合物的液相色譜法。
13、離子色譜法(ion chromatography ):以含有某種特定離子的水溶液作為流動相,流出液通過抑制柱(或不通過抑制柱),在降低流動相背景信號的條件下用于分離離子的液相色譜法。
14、離子抑制色譜法(ion suppression chromatography ):通過調(diào)節(jié)流動相的PH值來抑制試樣組分的電離,以分離離子型化合物的液相色譜法。
15、離子對色譜法(ion pair chromatography ):用形成離子對化合物進行分離的液相色譜法。16、疏水作用色譜法(hydrophobic interation chromatography ):用適度疏水性的固定相,以含鹽的水溶液作為流動相,借疏水作用分離生物大分子化合物的液相色譜法。
17、制備液相色譜法(preparative liquid chromatography):用能處理較大量試樣的色譜系統(tǒng),進行分離、切割和收集組分,以提純化合物的液相色譜法。
18、平面色譜法(planar chronatography):在平面介質(zhì)上進行組分分離的色譜法,也叫平板色譜法。
第三部分 常用術(shù)語
M:分子量
MC:二氯甲烷(methylene chloride)
MeOH:甲醇(methanol)
MS:質(zhì)譜
h:峰高
HPLC:高效液相色譜
ID:內(nèi)徑,dC
A:吸收度(式3.1,3.2);也作面積
ACN:乙腈(acetonitrile)
B(%B):二元流動相中的強溶劑(% v/v)
C8,C18:烷基鍵合相的鍵長度(八烷基或十八烷基)
CD:環(huán)糊精(cyclodextrin)
CV:變異系數(shù)(通常以%表示);式15.3
dC:色譜柱內(nèi)徑(cm)
dP:顆粒直徑(μm)
DAD:二極管陣列檢測器
EC:電化學(檢測器)
F:流速(ml/min)
FL:熒光(檢測器)
GS:梯度斜度參數(shù)(式8.2a);k*=20/GS
IEC:離子交換色譜(ion-exchange chromatography)
IPC:離子對色譜 (ion-paire chromatography)
k:保留因子(式2.4)
k*:梯度洗脫中,k的有效值或平均值(式8.1)
ka,kZ:色譜圖中,首峰(a)和末峰(z)的k值
L:色譜柱長度(cm)
LC-MS:液相色譜-質(zhì)譜
MTBE:甲基-叔-丁醚(methyl-t-butyl ether)
N:色譜柱塔板數(shù)(式2.82.8b)
N:噪音(式3.3,圖3.3)
NARP:非水反相HPLC
NPC:正相色譜
P:色譜柱壓力降(通常以psi表示)(式2.9)
pKa:酸或供質(zhì)子堿的酸性常數(shù)
PAH:多環(huán)芳烴(polyaromatic hydrocarbon)
RS:分離度(式2.1)
RI:折光指數(shù)
RPC:反相色譜
S:信號;式3.3;圖3.3;以及由式6.1定義的參數(shù)
tD:延遲或滯留時間(min,用于梯度洗脫中);等于VD/F
tG:梯度時間(min)
tR:保留時間(min)(圖2.2);等于tO(1+k)
tRa,tRz:色譜圖中首峰(a)與末峰(z)的保留時間,tR(min)(圖8.6a)
tO:色譜柱死時間(min)(式2.5)
t1,t2:相鄰譜峰1與譜峰2的保留時間(min)
TEA:三乙胺(triethylamine)
THF:四氫呋喃(tetrahydrofuran)
UV:紫外光譜
VD:延遲或滯留體積(mL);為梯度混合器與色譜柱人口之間的體積(包括混合器的體積)
Vm:色譜柱死體積(mL)(式2.6);Vm為色譜柱內(nèi)部的流動相體積,不包括附于固定相上的溶劑
Vmax:最大樣品體積(mL)(式13.1)
Va:樣品體積(mL)
w:重量(mg);也作半峰高處的峰寬(min)
wmax:不超載色譜柱的最大進樣量(mg)(式2.17)
wS:色譜柱的飽和容量(mg)(式13.4)
W:峰底寬(min)(圖2.2)
Wth:大進樣量對峰底寬的貢獻(min)(式13.2)
WO:小進樣量的峰底寬(min)
W1/2:半峰高處的峰寬(min)(圖1.1)
a:分離因子,等于k2/k1,其中k2與k1分別為相鄰譜峰2和譜峰1的k值
△tR:tRz-tR(min)
△%B:梯度洗脫期間,%B的變化
ε:摩爾吸收系數(shù)
εo:正相HPLC 中溶劑或溶劑混合液的強度
η:粘度(CP)
<<不常有符號>>
A,B,C:式2.11中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨k值而變化,但改變其它條件或溶質(zhì)時基本不變
A,B,C:式2.10中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化
A,B,C:式2.10a中的常數(shù);數(shù)值A(chǔ),B與C隨條件和樣品而變化
C:譜峰最大值處的濃度(mol/L)
CO:注入樣品中溶質(zhì)的濃度(mol/L)
GI:化學電離(MS)
DGA:N,N-二甲基-1-萘酰胺;(也作二甲基苯胺dimethylaniline)
EI:電子電離(MS)
ELS:蒸發(fā)光散射擊(Evaporative light scattering)
EtOAc:乙酸乙酯(ethyl acetate)
FAB:快速原子轟擊(MS)
FD:場解吸附(MS)
h:折合板高,等于H/dP(式2.11)
HB:羥基苯甲酸(hydrxybenzoic acid)(圖7.8,7.17與7.19)
HFBA:七氟丁酸(hyptafluorobutyric acid)
IPA:異丙醇(isopropanol)
kW:以水作為流動相的k值(式6.1)
LCEC:液相色譜電化學檢測器
LD:激光解吸(MS)
LSIMS:液態(tài)二級離子質(zhì)譜
MALDI:基質(zhì)輔助激光解吸電離
MP:對羥苯甲酸甲酯
[P-]m:流動相中離子對試劑P-的濃度(mmol/L)
PAD:脈沖電流分析檢測器
PBP:極性鍵合相
PD:等離子解吸(MS)
PP:對羥苯甲酸丙酯
PTH:乙內(nèi)酰苯硫脲
R+,R-:分別為陰離子與陽離子離子交換色譜柱中的荷電功能基困(式7.4和7.5[如-N(CH3)3+和-SO3-]
RF:響應因子
TBA+:四丁基銨離子
tBME:見MTBE
TMS:三甲基硅烷(trimethylsilyl;也為C1)
TNB:1,3,5-三硝基苯(1,3,5-trinitrobenzene)
TOF MS:時間飛行質(zhì)譜
TSP:熱噴霧(MS)
u:流動相通過色譜柱的速度(cm/s);等于L/to
V:峰底寬(mL)
Vc:色譜柱內(nèi)峰展寬對V的貢獻;也作小樣品量峰底寬(mL)(式2.16)
VR:保留體積(mL)
W:峰寬(min)(式2.12)
Wc,WS,:分別為色譜柱,進樣器,連續(xù)管和流通池對W的貢獻(min)
Wlc,Wfc:(式2.12)
X,X1,:無特征結(jié)構(gòu)的溶質(zhì)(圖7.8,7.17和7.19)
X2,X3
XB:流動相中的B溶劑的摩爾分數(shù)
V:折合速度,等于udp/Dm(式2.11)
б:高斯曲線的標準偏差;等于峰底的1/4
ι:檢測器響應時間常數(shù)(S)
φ:流動相中B溶劑的體積分數(shù);等于0.0